Fenol-hloroformna ekstrakcija

Izvor: Wikipedia
Fenol-hloroformna ekstrakcija

Fenol-hloroformna ekstrakcija (PC, PCIA) je tehnika likvid–likvid ekstrakcije u biohemiji. Ona je u širokoj upotrebi u molekularnoj biologiji za izolaciju DNK, RNK i proteina.[1][2] Jednake zapremine fenol:hloroforma i vodenog uzorka se pomešaju, čime se formira emulzija. Ovaj metod može da traje duže od kolonskih metoda poput silika-baziranog prečišćavanja, mada u nekim slučajevima proizvodi nukleinske kiseline veće čistoće. RNK kolona tipično nije podesna za prečišćavanje kratkih (<200 nukleotida) uzoraka, kao što su siRNA, miRNA, gRNK i tRNK. kolumnski metodi isto tako kidaju dugačke DNK fragmente, što je u nekim slučajevima nepoželjno.

Reference[uredi - уреди]

  1. Chomczynski, P. & Sacchi, N. (1987). "Single-step method of RNA isolation by acid guanidinium thiocyanate-phenol-chloroform extraction". Anal. Biochem. 162: 156–159. doi:10.1016/0003-2697(87)90021-2. PMID 2440339. 
  2. Chomczynski, P. & Sacchi, N. (2006). "Single-step method of RNA isolation by acid guanidinium thiocyanate-phenol-chloroform extraction: Twenty-something years on". Nature Prot. 1 (2): 581–585. doi:10.1038/nprot.2006.83. PMID 17406285. 

Spoljašnje veze[uredi - уреди]